10月28日“世界男性健康日”，主题是关注男性健康，关注男性生殖健康。法医物证室2015年开展了Y染色体AZF区微缺失异常的检测，积极帮助男性不育患者查找病因，解决不育家庭生育问题；至今已检测上千例样本，为临床辅助生殖提供了科学的指导和诊断依据。

Y染色体AZF区

Y染色体长臂无精子症因子（azoospermia factor，AZF）微缺失是男性不育常见因素，仅次于克氏综合征。AZF区分为AZFa、AZFb、AZFc三个区。常见四种缺失类型：

1. AZFa区缺失，占比为0.5%~4%，缺失导致无精子症；

2. AZFb区缺失，占比为1%~5%，缺失导致无精子症；

3. AZFbc区缺失，占比为1%~3%，缺失导致无精子症；

4．AZFc区缺失，占比为80%，常导致少精或弱精；

AZFc区有b2/b4、b1/b3、b2/b3、gr/gr四类亚型，其中b2/b4、gr/gr最常见；b2/b4缺失，可导致精子发生障碍的风险高达145倍。gr/gr缺失的致病性仍有争议，其缺失的频率和表型效应在不同种族之间有显著的差异。

Y染色体AZF区的检测- STS-PCR技术

序列标记位点的聚合酶链式反应技术(PCR of sequence-tagged site，STS-PCR)是目前临床常用的AZF区微缺失检测技术，该技术能检测6个STS位点 ：

  AZFa区的SY84、SY86位点

AZFb区的SY127、SY134位点

AZFc区的SY255、SY254位点

但是该技术不能深入分析AZF区拷贝数变异，特别是 AZFc区gr/gr缺失及复杂的重排等变异。在2023年，法医物证室高慧在《中华医学遗传学杂志》发表了《精子发生障碍患者Y染色体AZF区拷贝数变异分析》文章，其收集2016年1月至2022年10月就诊于深圳市人民医院的就诊于深圳市人民医123例精子发生障碍患者及100例精液正常的男性，应用多重连接探针扩增技术（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）检测其AZF区，深入分析AZF区的拷贝数变异（copy number variation，CNV）与男性精子发生障碍的关系。

Y染色体AZF区的检测-MLPA技术

MLPA技术中P360试剂盒（荷兰MRC-Holland公司）包含55个探针，其中12个位于常染色体，作为内部对照探针，43个位于Y染色体AZF区（AZFa、AZFb和AZFc检测探针分别为16、15和12个）。在研究中， 223例受试者中检出19种CNV，其中重复（7例）、AZFc区的gr/gr缺失（14例）及6种复杂重排（17例），应用常规的 STS-PCR技术均无法检测。

图：复杂重排为gr/gr缺失×2合并b2/b4重复×1，gr/gr缺失×3合并b2/b4重复×2等等。

Y染色体AZF区的CNV与男性精子发生障碍的关系

1. AZFa区与AZFb区的CNV对男性的精子发生有严重的影响，但AZF a区部分缺失对男性的精子发生影响较小，可能不会影响男性不育，需进一步检查，判读缺失片段的大小，才能进一步确诊。

2. AZFc区的b2/b4缺失与复杂重排等CNV影响男性精子发生，可认为是男性不育的风险因子。

3. AZFc区gr/gr缺失无统计学意义，在正常男性中均可见，故gr/gr缺失不能作为深圳地区男性不育的风险因子。

综上分析了Y染色体AZF区CNV，了解到临床STS-PCR技术检测分析 AZF区微缺失的6个STS位点的局限性。6个STS位点不能表示AZF区的全部范围，当临床表型与基因型不一致时，当AZF区部分缺失时，建议应用MLPA进一步验证，避免误诊。